黎明导读
近二十年来，人类深部真菌感染的发病率逐年增加，医院内感染致病菌的第六位，在排名前十的致病菌中，真菌感染死亡率最高。准确诊断是否感染，在选择合适的治疗方法时非常重要。
背景介绍：
近二十年来，人类深部真菌感染的发病率逐年增加，医院内感染致病菌的第六位，在排名前十的致病菌中，真菌感染死亡率最高。这表明医院感染的主要致病菌之一，原因是通常真菌并不使人治病，但当机体抵抗力下降时，常引起真菌感染；此外浅部真菌感染的发病率也逐年上升，这是由于人们对浅部真菌感染的不重视，危害性认识不够，才导致有病往往任其发展。准确诊断是否感染，在选择合适的治疗方法时非常重要，对可靠的诊断来说，最好的方法是从临床标本中分离出感染的病原菌，并进行形态学鉴定。
真菌感染分类
1:浅部真菌感染
a.主要为皮肤丝状真菌
b.侵犯皮肤、毛发、指甲
c.慢性，对治疗有顽固性
2:深部真菌感染
a.侵犯皮下深部组织、内脏及全身的真菌，在一定情况下可引起全身性感染。
b.可侵犯全身内脏，严重的可引起死亡。
c.临床上危害很大，严重的可引起死亡。
皮下组织真菌病
系统性真菌病（侵袭性真菌病）皮下组织真菌病
浅部真菌感染--皮肤癣菌病：
定义：由皮肤癣菌侵犯表皮、毛发和指趾甲引起的传染性皮肤病，简称为癣。
皮肤癣菌是接触传染通常通过人与人或动物至人传染。不论男女老少，只要反复接触患者均有可能被感染。
皮肤癣菌病分类：
头癣足癣体股癣足癣体股癣
皮肤癣菌根据大分生孢子的形态可分为以下三属：
毛癣菌表皮癣菌小孢子菌定义：真菌病根据感染层面分为：浅表、皮下和全身，浅表真菌感染在临床皮肤病中最常见。浅表真菌病涉及表皮、毛发和甲的感染，由小孢子菌发癣菌念珠菌和马拉色菌感染引起。深部真菌感染：深部真菌感染
深部真菌病(invasivefungalinfection)是指致病性真菌侵犯皮下组织、黏膜和内脏，感染器官所引起的真菌感染性疾病。其中以白色念珠菌为主。
发病原因念珠菌属占主要致病菌的80%以上，其中主要为白色念珠菌。但近年来，非白色念珠菌逐渐增多(如热带念珠菌、光滑念珠菌等)。其他常见的致病菌主要包括隐球菌、曲霉菌、毛霉菌、孢子丝菌、马内菲青霉菌、组织胞浆菌、副球孢子菌和皮炎芽生菌等。感染途径通常是血行播散和上行感染。
侵袭性真菌病(invasivefungaldisease,IFD)，又称侵袭性真菌感染，是指真菌侵入人体组织、血液，并在其中生长繁殖导致组织损害、器官功能障碍和炎症反应的病理改变及病理生理过程。主要包括念珠菌病、曲霉病、隐球菌病、接合菌病和马内菲青霉病等。
临床标本真菌检查方法诊断方法对比
直接显微镜检查：
将所取标本直接置于玻片上,用染色或加10％KOH溶液,在光镜下检查。先在低倍镜下检查有无菌丝和孢子,然后用高倍镜观察菌丝和孢子的形态、特征、位置、大小和排列等，大致区分其种属。评价：直接涂片镜检是一种常用、简便而迅速的真菌检测方法。但该法阳性率不高，经验不足会造成漏诊；适用范围受限制，很多真菌不能通过直接镜检来确定,还需要进一步培养鉴定。分离培养方法：取毛发、皮屑、甲屑等标本，用70％乙醇消毒，接种沙保氏琼脂斜面培养基，25℃培养7～14天，根据菌落形态及颜色、并挑取菌落镜检菌丝及孢子的特征进行鉴定。评价：真菌生长缓慢,培养常需要数天甚至数周才有结果,敏感性低。培养方法是通过表型特征来鉴定真菌,而表型特征容易受到外界因素如温度变化或药物治疗的影响。有些标本采集困难。血清学方法：目前对真菌感染血清抗原检查主要有：分子生物学方法：分子生物学方法包括:限制性片断长度多态性分析(RFLP)、随机扩增多态性分析(RAPD)、脉冲电泳分析（PFGE）、核酸杂交法、rDNA序列测定、蛋白编码基因测序、任意引物聚合酶链反应(AP-PCR)。评价：分子生物学方法运用聚合酶链反应(PCR)等特殊技术，具有敏感度高、特异性强等特点。但需要特殊设备，检测成本高，操作难度大，要求严格，真正用于临床还需进一步标准化。与传统真菌镜检与真菌荧光染色对比表一种快速检测真菌的试剂，检测范围广，阳性率高，远优于传统湿片法，临床上毛囊炎糠秕孢子，马拉色菌的检测湿片法基本无效，而荧光法可敏感快速的检测出来，医保收费，需使用荧光显微镜。内容传统真菌镜检真菌荧光染色真菌荧光染色的临床优势操作环节取样→滴加一定浓度的KOH溶液→经酒精灯加热固定→光学显微镜观察取样→滴加荧光染色液→加盖盖玻片→荧光显微镜观察操作同样简洁，需要时间短，适用于临床大样本，快速检测。检测结果找到真菌菌丝或者孢子结构，得出结果根据看到荧光标记的真菌菌丝或者孢子结构，得出结果可以明确明辨糠皮孢子感染、马拉色菌感染(检查糠皮孢子的派克墨水法敏感度更高，不用加热环节，有利于临床实际应用。)浮载液10%~20%的KOH或者复方氢氧化钾溶液配方KOH（氢氧化钾）溶解杂质细胞，荧光剂：与真菌细胞壁中成分发生非特异性的结合；1、检测灵明度很高，减少检查结果假阴性的发生，进而降低漏检漏检率，提高了皮屑真菌检测的准确率；2、视野清，反应为荧光反应，因此其结果在显微镜视野中以清晰的荧光表现，更易于观察；3、抗干扰强，检测原理是染色液与真菌细胞壁中几丁质等多糖成分反应，因此可排出检测中的其他干扰。检测器材光学显微镜荧光显微镜，显微成像系统（CCD），电子狗荧光显微镜：产生匹配染色液中荧光染色剂的激发光，我们所需的激发光为紫外光，并在目镜下观察染色剂染色效果的仪器；显微成像系统：可将荧光显微镜目镜视野中的染色结果呈现在电脑屏幕上；有利于对检测结果的再次开发使用，如科研、教学等电子狗：显微镜厂家为方便在特定电脑上使用厂家设计的报告打印系统所提供的一个安全保护措施。辅助材料载玻片，盖玻片，滤纸载玻片，盖玻片，滤纸与传统镜检方式用材一样
与传统方法优劣势对比：
检测方法
可操作性
检测周期
检测成本
灵敏度性
漏诊率
适用范围
真菌荧光染色
简单
短
一般
高
低
大
KOH湿片法
简单
短
低
低
高
小
荧光两步法
一般
一般
一般
一般
低
大
血清学方法
一般
一般
一般
高
一般
一般
分子生物学法
复杂
一般
高
高
低
大
真菌荧光染色液（一步法）
真菌性鼻窦炎：
研究者们发现，影响三千七百万美国人的鼻窦炎，显然是由免疫系统对真菌的反应而引起的。这一发现是一个潜在的突\ub破，给成千上万受鼻窦炎之苦的人带来了希望。在收集和化验病人粘液时，发现人中的人粘液中有菌。当身体面对免\ub疫系统的反应时，身体自动地发生了某些变化。真菌似乎是一切麻烦中的元凶，这时，身体做出的不仅仅是抗过敏的反应，而\ub实际上是一种免疫系统的反应。过去，只有10%的慢性鼻炎被诊断为真菌过敏，而现在看来几乎所有的慢性鼻窦炎，都与免\ub疫系统对真菌的反应有关。
近年，欧美学者的研究发现：92%～96%慢性鼻-鼻窦炎/鼻息肉病的鼻分泌物中真菌培养阳性，94%～96%慢性鼻-鼻窦炎\ub的粘液素中大量嗜酸细胞聚集成簇，73%～81%慢性鼻-鼻窦炎手术后标本中能鉴别真菌。鉴于上述发现，学者们认为，以往认\ub为变应性真菌性鼻-鼻窦炎是IgE介导的Ⅰ型变态反应是错误的。提议变应性真菌性鼻-鼻窦炎改称为嗜酸细胞性真菌性鼻-鼻窦炎\ub
真菌性外耳道炎：
真菌性外耳道炎是一种较为常见的耳部疾病，但很多人对它的症状却一点都不了解，由此导致很多人在自己出现真菌性外耳道炎的症状后还不自知，进而病情被延误，加重了治愈难度。
说明：1.研究者采用四种不同的方法对名真菌性角膜溃烂病人进行检测，结果发现在这四种方法里，荧光法阳性率最高，达到99.1％。2.该表数据引自：GuptaMK,ChandraA,PrakashP,etal.FungalkeratitisinnorthIndia;SpectrumanddiagnosisbyCalcofluorwhitestain.IndianJMedMicrobiol,,33(3):-3.注：该文献使用的荧光法与本产品方法一致，而且本产品是在该荧光法的基础上进行优化处理，所以效果更佳。
产品介绍检测原理：
真菌荧光染色液是一种含有荧光素和抑制背景荧光着色试剂的复合溶液。如果待测标本中含有真菌，经过特殊荧光素标联的重组几丁质酶可以高亲和力将与非特异真菌细胞壁上的β-多糖结合,如几丁质和纤维素等,在荧光显微镜下可清楚的观察到看到真菌形态在特定激发光下产生的荧光。试剂内含KOH可用于溶解角质，有助于更清晰的观察真菌结构。作为一种快速检测真菌的新型染色液，可用于皮肤科、ICU科室等各种疑似真菌感染的检查,如体股癣,手足癣,甲癣和花斑癣、肺部真菌感染等.
真菌立明TM
：真菌荧光染色液（一步法）
：20测试/盒（1ml）、测试/盒、测试/盒、测试/盒、测试/盒、测试/盒
：用于各种真菌染色
：真菌荧光染色液是一种能快速检测真菌的新型染色液，适用于皮肤科各种疑似真菌感染的检查，如体股癣，手足癣，甲癣和花斑癣等。传统方法只能检测某些特定的真菌,而不能对所有的真菌进行检测,而该荧光染料能够与各类真菌结合而发出荧光，包含念珠菌，组织胞浆菌，曲霉菌、毛癣菌、马拉色菌及曲霉菌等。此外，该款试剂盒还能检测出卡氏肺孢子虫囊肿，寄生物（例如疟原虫），以及各类地域性变异真菌菌丝。角蛋白，胶原蛋白，弹性纤维也能使用本试剂盒进行检测，可将这些物质的结构边界进行荧光标记从而能够明显区分并检出。
：常温、避光；有限期2年
：南京黎明生物制品有限公司
：文经理
点击→南京黎明生物—产品介绍
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